送样方式:
可接收固定好的细胞/组织样品并附有详细送检要求的送样单。
①需要您提供的样品:收集细胞/组织取样(新鲜迅速取材),置于1.5ml离心管内,加入2.5%的戊二醛溶液(固定液加满离心管,使样品完全浸没在固定液中),可放置于4°C保存,请不要倒弃固定液,一般固定12h后可寄送(务必采用1.5ml离心管寄送)。
②打印填写完整的预约单、送样单和样品一起寄送。
具体取材及固定方法如下:
1.对于细胞类,106以上的细胞,用细胞刮刀刮下来(不要反复刮取,动作迅速一次性刮取下来),1500-3000转离心,5-10min,收集细胞于管底肉眼可见2-3粒大米状样品,如果细胞量很多,把细胞团块用细针尖挑成几个小团块,弃上清,沿管壁缓慢加入4℃预冷的固定液,然后放入4°C冰箱保存。
2.对于组织类,新鲜取材,取材位置准确,组织大小尽量在1-2mm³,离体取材后请立即投入4℃预冷的固定液中,然后放入4°C冰箱固定保存(对于无法下沉的样品,一定要通过抽真空,让样品沉下去)。
3.对于细菌类,吸取OD0.5-0.8的培养物,离心后弃培养基,收集菌体沉淀于管底黄豆大小,可以用PBS洗1-2次,弃掉上清液,沿管壁缓慢加入4℃预冷的固定液,然后放入4°C冰箱保存(固体培养的标本取样时尽可能把培养基削薄一点,块切小)。
前处理:
倒掉固定液,用0.1M,pH7.0的磷酸缓冲液漂洗样品三次,每次15min;用1%的锇酸溶液固定样品1-2h;小心取出锇酸废液,用0.1M,pH7.0的磷酸缓冲液漂洗样品三次,每次15min;用梯度浓度(包括30%,50%,70%,80%,90%和95%五种浓度)的乙醇溶液对样品进行脱水处理,每种浓度处理15min,再用100%的乙醇处理20min;最后过度到纯丙酮处理20min。用包埋剂与丙酮的混合液(V/V=1/1)处理样品1h;用包埋剂与丙酮的混合液(V/V=3/1)处理样品3h;纯包埋剂处理样品过夜;将经过渗透处理的样品包埋起来,70℃加热过夜,即得到包埋好的样品。样品在超薄切片机中切片,获得70-90nm的切片,切片经柠檬酸铅溶液和醋酸双氧铀50%乙醇饱和溶液各染色5-10min,晾干后即可在透射电镜中观察。
服务周期:
一般为样品接收后的3周左右,如遇法定假期需要顺延。
交付内容:
每样提供10张拍摄图片(不提供分析服务),如需照片数量超过10张,按照40元/张收费。